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細胞與免疫學試劑
轉(zhuǎn)染試劑
轉(zhuǎn)染試劑(Lipo3000)
品牌 | 其他品牌 | 貨號 | TR002 |
---|---|---|---|
規(guī)格 | 0.75ML,1.5ML | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
轉(zhuǎn)染試劑Lipo3000
產(chǎn)品貨號:TR002
存儲條件:2-4℃保存1年。(避免冷凍)
產(chǎn)品說明
LABLEAD Lipo3000試劑采用了脂質(zhì)納米顆粒(Lipid Nanoparticle)LNP遞送技術, 利用脂質(zhì)形成納米微粒將核酸包裹起來形成核酸脂質(zhì)納米粒,實現(xiàn)高轉(zhuǎn)染性和可重復性的實驗結(jié)果。其可針對廣泛類型的常見及難轉(zhuǎn)染細胞,實現(xiàn)超高轉(zhuǎn)染效率,同時提供更高的細胞活力。Lipo3000對大多數(shù)細胞毒性低并且性質(zhì)溫和,并且我們優(yōu)化了轉(zhuǎn)染過程的全部四個步驟,并結(jié)合脂質(zhì)體納米顆粒(LNP)遞送技術,實現(xiàn)了較高的轉(zhuǎn)染性能并可以降低所需的試劑量,同時盡可能降低對細胞系產(chǎn)生毒性的風險。對多種類型的細胞和培養(yǎng)板都具有高轉(zhuǎn)染效率;轉(zhuǎn)染時血清的存在不影響轉(zhuǎn)染效率的優(yōu)點。
適用范圍:貼壁細胞和懸浮細胞(哺乳動物細胞系)的轉(zhuǎn)染。
產(chǎn)品特點:
1) 卓yue的轉(zhuǎn)染效率—針對較難轉(zhuǎn)染細胞,可將效率提升2~10倍
2) 作用溫和,細胞毒性低—可改善細胞活力
3) 高性價比高,同時實現(xiàn)更好的轉(zhuǎn)染結(jié)果
使用方法
DNA的轉(zhuǎn)染
對大多數(shù)細胞來說,轉(zhuǎn)染時高的細胞密度可以得到高的轉(zhuǎn)染效率和表達水平,并能減少細胞毒性。
1.接種細胞至70-90%匯合度時轉(zhuǎn)染。
2.按照下表使用Opti-MEM培養(yǎng)基稀釋Lipo3000-B試劑(建議同時用2管),充分混勻
3.使用Opti-MEM培養(yǎng)基稀釋DNA,制備DNA預混液,然后添加Lipo3000-A 試劑,充分混勻。
4.在每管已稀釋的Lipo3000-B試劑中加入稀釋的DNA (1:1比例)。
5.室溫孵育5分鐘。
6.加入DNA-脂質(zhì)體復合物至細胞中。
7.37℃孵育細胞2-4天。然后分析轉(zhuǎn)染細胞。
siRNA轉(zhuǎn)染
轉(zhuǎn)染siRNA至細胞中時,遵循如上所述的DNA實驗方案,但在稀釋siRNA時不要加入Lipo3000-A試劑(第3步)。
細胞培養(yǎng)容器 | 96-well | 24-well | 6-well | |
貼壁細胞 | 1~4×104 | 0.5~2×105 | 0.25~1×106 | |
Opti-MEM培養(yǎng)基稀釋Lipo3000-B試劑(建議同時用2管) | Opti-MEM培養(yǎng)基 | 5ul×2 | 25ul×2 | 125ul×2 |
Lipo3000-B | 0.15和0.3ul | 0.75和1.5ul | 3.75和7.5ul | |
Opti-MEM培養(yǎng)基稀釋DNA,制備DNA預混液,然后添加Lipo3000-A試劑,充分混勻 | Opti-MEM培養(yǎng)基 | 10uL | 50ul | 250ul |
DNA (0.5–5 ug/ul) | 0.2ug | 1ug | 5ug | |
Lipo3000-A試劑(2 ul/ug DNA) | 0.4ul | 2ul | 10ul | |
Lipo3000-B試劑中加入稀釋的DNA (1:1比例) | 稀釋的DNA | 5ul | 25ul | 125ul |
稀釋的Lipo3000-B | 5ul | 25ul | 125ul | |
室溫孵育5分鐘 | ||||
加入DNA-脂質(zhì)體復合物至細胞中 | 96-well | 24-well | 6-well | |
DNA-脂質(zhì)體復合物 | 10uL | 50ul | 250ul | |
37°C孵育細胞2–4天。然后分析轉(zhuǎn)染細胞。 |
特別提醒:
本公司所有產(chǎn)品僅供專業(yè)人員用于生命科學研究,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅。
常見細胞的轉(zhuǎn)染效率(僅供參考,實驗條件不同轉(zhuǎn)染效率會有較大差別)